Para saintis dan doktor dari Jerman dan Itali dua tahun lalu dapat mengganti 80 peratus kulit budak lelaki yang menderita epidermolisis bullosa dengan kulit transgenik dari selnya sendiri. Penyakit ini tidak muncul lagi. Penyelidikan yang diterbitkan di Nature.
Menurut nplus1.ru, epidermolysis bullosa (EB) adalah penyakit genetik yang dicirikan oleh pembentukan lepuh dan erosi pada kulit dan membran mukus, serta kepekaan kulit terhadap kecederaan ringan. BE dibahagikan kepada tiga jenis utama: sederhana, garis batas, distrofik, yang ditentukan oleh tahap lecet pada lapisan kulit. Dengan jenis garis batas, yang diderita oleh pesakit, gelembung terbentuk pada tahap plat cahaya (lamina lucida).
Ini disebabkan oleh gangguan gen LAMB3, yang mengekodkan laminin β3 protein sari epidermis. Dalam kes ini, hubungan mekanikal antara epidermis dan dermis terganggu. Pesakit mengalami kesakitan yang teruk, sering mengalami jangkitan kulit dan barah.
Sebelum ini, penyakit ini dianggap tidak dapat diubati. Menurut persatuan antarabangsa DEBRA International, kira-kira setengah juta orang sakit dengannya di dunia (di Amerika Syarikat, satu daripada 50,000 kanak-kanak dilahirkan dengan epidermolisis bullosa).
dan. Pesakit sebelum pembedahan. b. Diagram kawasan yang terjejas (hijau menunjukkan kawasan dengan gelembung, merah - dengan epidermis yang hilang), h. Kulit yang dibina semula dengan sedikit lepuh (≤2% permukaan), d. Keanjalan kulit yang normal. e. Tiada lepuh baru di laman biopsi. Foto: Tobias Hirsch et al / Nature, 2017
Semasa sidang media telefon dengan Nature, penulis kajian mengatakan bahawa prognosis pesakit yang bekerja dengannya sangat buruk, dia telah kehilangan hampir semua epidermis, menderita distrofi, dan dia selalu memerlukan morfin. Selama tahun lalu sebelum bermulanya eksperimen, dia hanya makan melalui tabung, dan memerlukan banyak usaha untuk membuatnya tetap hidup. Pada masa itu, pesakit berusia tujuh tahun.
Pemindahan kulit ayah dan percubaan untuk menggunakan analog tiruan tidak membantu - kulit tidak berakar, dan para doktor percaya bahawa pesakit secara praktikalnya tidak mempunyai peluang untuk bertahan hidup. Kini, dua tahun kemudian, dia masih hidup, berasa sihat, bermain sukan di sekolah, dan kulitnya tidak ada lepuh.
Untuk membuat kulit transgenik, biopsi epidermis (sekitar empat sentimeter persegi) diambil dari pesakit dan kultur individu ditanam pada lapisan fibrin. Mereka dirawat dengan vektor retroviral yang memperkenalkan salinan gen LAMB3 yang "sihat" ke dalam genom. Pada masa yang sama, gen itu jatuh ke tempat yang sewenang-wenangnya, namun, analisis PCR menunjukkan bahawa selalunya ia jatuh ke urutan gen yang bukan pengekodan dan tidak mengganggu kerja gen lain.
Video promosi:
Semasa bekerja dengan kulit transgenik, saintis tidak melihat masalah yang berkaitan dengan penggunaan vektor retroviral untuk pengubahsuaian genom. Di samping itu, mereka menekankan bahawa pengubahsuaian genetik dalam jenis pembedahan ini hanya mempengaruhi kulit, jadi tidak ada risiko untuk mempengaruhi seluruh tubuh.
Kultur sel epidermis ditanam dalam bentuk kepingan besar, ketebalannya dapat dikendalikan, sama dengan kultur sel kulit pesakit sendiri sekiranya terjadi luka bakar. Lapisan kemudian diletakkan dengan hati-hati pada dermis yang terdedah, yang telah sepenuhnya antibakteria. Jahitan dan manipulasi mekanikal lain tidak diperlukan, lapisannya berakar dengan sendirinya.
Penstabilan utama kulit baru, kata para saintis, mengambil masa sekitar dua minggu. Selepas itu, kulit kelihatan dan terasa hampir seperti kulitnya sendiri. Ia juga secara beransur-ansur mula menumbuhkan rambut dan mengembangkan peluh dan kelenjar sebum. Transplantasi dilakukan dalam tiga peringkat, dan secara umum, keseluruhan rawatan memakan masa sekitar lapan bulan.
Para saintis percaya bahawa kulit pesakit akan tetap sihat sepanjang hayatnya, kerana pengubahsuaian genetik telah dilakukan, termasuk dalam sel-sel progenitor (sel induk pada tahap utama pembezaan). Sel-sel ini mengekalkan ukuran populasi mereka pada tahap tertentu dan, jika perlu, menggantikan sel-sel epidermis (keseluruhan epidermis diganti kira-kira sebulan sekali).
Penggantian epidermis secara beransur-ansur dengan pelbagai jenis sel keturunan. Foto: Tobias Hirsch et al / Nature, 2017
Penjejakan klon sel menunjukkan bahawa sel stem yang disebut "holoclonal" (lama dan praktikal tidak dibezakan) bertanggungjawab terutamanya untuk pertumbuhan semula epidermis jangka panjang. Para saintis menekankan bahawa pesakit, yang pada tahun 2006 dalam operasi yang serupa telah mengganti kulit kakinya, telah kekal sihat selama 11 tahun.
Pada masa ini, para saintis telah melancarkan dua kajian klinikal selari baru, di mana mereka merancang untuk memperbaiki kaedah mereka dan memantau kemungkinan kesan sampingan.
